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果汁-亚硝酸盐的测定-盐酸萘乙二胺法
1 范围
本方法规定了果汁中亚硝酸盐的测定方法,其检出限为1 mg/kg.
2 原理
浓缩果汁、果汁及其饮料中的亚硝酸盐主要是植物从土壤中吸收后存积地果实中带来的,多以钠盐的形式存在.样品经沉淀蛋白质、除去脂肪后,在弱酸条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后,再与盐酸萘乙二胺偶合形成紫红色染料,与标准比较定量.
3 试剂
实验用水为蒸馏水,试剂不加说明者,均匀分析纯试剂.
3.1 亚铁氰化钾溶液:称取106.0g亚铁氰化钾〔K4Fe(CN)6•3H2O〕,用水溶解,并稀释至1000mL;
3.2 乙酸锌溶液:称取220.0g乙酸锌〔Zn(CH3COO)2•2H2O〕,加30mL冰乙酸溶于水,并稀释至1000mL;
3.3 饱和硼砂溶液:称取5.0g硼酸钠(Na2B4O7•10H2O),溶于100mL热水中,冷却后备用;
3.4 对氨基苯磺酸溶液(4g/L):称取0.4g对氨基苯磺酸,溶于100mL20%盐酸中,置棕色瓶中混匀,避光保存;
3.5 盐酸萘乙二胺溶液(2g/L):称取0.2g盐酸萘乙二胺,溶解于100mL水中,混匀后,置棕色瓶中,避光保存;
3.6 亚硝酸钠标准溶液:准确称取0.1000g于硅胶干燥器中干燥24h的亚硝酸钠,加水溶解移入500 mL容量瓶中,加水稀释至刻度,混匀.此溶液每毫升相当于200μg的亚硝酸钠;
3.7 亚硝酸钠标准使用液:临用前,吸取亚硝酸钠标准溶液5.00mL,置于200mL容量瓶中,加水稀释至刻度,此溶液每毫升相当于5.0μg亚硝酸钠.
4 仪器
4.1 小型绞肉机;
4.2 分光光度计.
5 分析步骤
5.1 样品处理
称取约5.0经绞碎混匀的试样,置于70mL烧杯中,加12.5mL硼酸饱和液,搅拌均匀,以70℃左右的水300mL将试样洗入500mL容量瓶中,于沸水浴中加热15min,取出后冷至室温,然后一面转动,一面加入5mL亚铁氰化钾溶液,摇匀,再加入5mL乙酸锌溶液,以沉淀蛋白质.加水至刻度,摇匀,放置0.5h,除去上层脂肪,清液用滤纸过滤,弃去初滤液30mL,滤液备用.
5.2 测定
pt真人娱乐吸取40.0mL上述滤液于50mL带塞比色管中,另吸取0.00、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00、1.50、2.00、2.50mL亚硝酸钠标准使用液(相当于0、1、2、3、4、5、7.5、10、12.5μg亚硝酸钠),分别置于50mL带塞比色管中.于标准管和试样管中分别加入2mL对氨基苯磺酸溶液(4g/L),混匀,静置3min~5min后各加入1mL盐酸萘乙二胺溶液(2g/L),加水至刻度,混匀,静置15min,用2cm比色杯,以零管调节零点,于波长538nm处测吸光度,绘制标准曲线.同时做试剂空白.

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